joi, 13 iulie 2023

Microbiotă

 Microbiotă


Microbiota, numită și microbiom, reprezintă ansamblul microorganismelor comensale, simbiotice, sau patogene care populează un ecosistem sau habitat (de ex. solul, apele, laptele, plantele, animalele, omul). Microorganismele care constituie o microbiotă sunt reprezentate de bacteriiarheealge unicelulare, protozoarefungi și virusuri. Termenul "microfloră" (= ansamblul microorganismelor de natură vegetală, de exemplu, algele) este incorect utilizat în locul celui de microbiotă cu referire la ansamblul microorganismelor dintr-un mediu dat. Termenul microbiom care este sinonim cu microbiota, are și alt sens: genomul colectiv al microorganismelor care care populează un ecosistem.[1][2]

Microbiota omului și animalelorModificare

La om și animale microbiota este formată de microorganisme care populează tegumentul, cavitățile, tractul digestiv și respirator, vaginul, realizând populații cu o densitate foarte mare de LactobacillusBacteriodesStreptoccocusCandidaEscherichia etc. Numărul microorganismelor la omul adult este apreciat la circa 1014 celule, cu un grad de mărime peste numărul total al celulelor organismului uman (1013). Și totuși fătul este steril în uter. Fără microbiotă din rumen existența erbivorelor ar fi practic imposibilă. Populațiile de microorganisme din tubul digestiv și gazda lor funcționează ca un sistem ecologic al cărui echilibru este indispensabil pentru sănătatea individului.[2][1]

După sediul microbiotei se disting: microbiota tegumentului (pielii)microbiota căilor respiratorii superioare (nările, nasofaringele; traheea, bronhiile, bronhiolele sunt normal sterile), microbiota tractului gastrointestinal (cavitatea bucală, placa dentară, esofagul, stomacul, duodenul, intestinul subțire, colonul, microbiota fecalelor), microbiota tractului genito-urinar (vaginuluretra distală; căile urinare superioare - vezica urinară, ureterele, bazinetul - sunt normal sterile), microbiota ochiului (pe membrana conjunctivală și suprafața ochiului), microbiota urechii (include microorganismele prezente normal în canalul auditiv extern).[2][1]

După originea microbiotei se disting 2 tipuri: alohtonă și autohtonă.

Microbiota alohtonăModificare

Microbiota alohtonă este reprezentată de microorganisme (bacterii, microfungi, protozoare) care provin din mediul extern (aer, sol, apă, sau de la alte organisme). De regulă, sunt numai tranziente, fără să contribuie semnificativ la activitatea microbiotei autohtone, la ale cărei condiții nu se pot adapta.[2][1]


Microbiota autohtonăModificare

Microbiota autohtonă (numită și microbiotă indigenămicrobiotă normalăfloră normalăindigenă sau naturală) este reprezentată de microorganismele indigene sau autohtone, care realizează o gamă foarte diversificată de activități cu efect benefic asupra organismului purtător (gazdă). Microbiota indigenă are rol bine definit în menținerea funcțiilor normale și a sănătății gazdei: roluri nutritive, stimulent pentru dezvoltarea competenței imune, barieră ecologică antimicrobiană. Microbiota intestinală autohtonă produce diferiți fermenți care hidrolizează macromolecule nedigerate ajunse în intestinul gros; tot aici are loc fermentația hexozelor de către comunitatea complexă de bacterii, rezultând acizi organici volatili, metan, CO2 (la rumegătoare microbiota rumenului este esențială pentru digestie), tot ea asigură transformarea polizaharidelor complexe (celuloză, hemiceluloze, pectină, amidon, lignină) la forme asimilabile; de asemenea grăbește tranzitul intestinal și produce cantități importante de vitamine (e.g., biotină, acid pantotenic, piridoxină, riboflavină, vitamină K) utile pentru gazdă, dar și pentru creșterea altor bacterii. Microbiota are rol de barieră antiinfecțioasă antimicrobiană, microbiota normală antagonizează microbii patogeni prin: competiția vitală pentru receptori și locuri libere pe suprafața celulelor, pentru nutrienți; inhibiția realizată de metaboliți toxici (H2O2, pH acid etc.); antibioticele afectează microbiota normală intestinală și permit colonizarea și multiplicarea unor microbi patogeni anaerobi (Clostridium difficile etc.); pentru restabilirea microbiotei normale se folosesc probioticele sau transplantul fecal (transplantul de microbiotă fecală). Microbiota poate avea și un rol negativ, de ex. Helicobacter pylori, care este potențial patogen și duce la apariția gastritei, ulcerului gastroduodenal. Un efect mai subtil, cu caracter insidios, este cel de implicare microbiotei colonului, posibil indirectă, în cancerul de colon, mai frecvent la persoanele cu regim bogat în grăsimi și proteine decât la cele ce consumă fibre vegetale


Sursa: Wikipedia.ro

marți, 11 iulie 2023

Testul Western Blotting

 Western Blotting


Blotting este una dintre cele mai răspândite și utile metode analitice pentru detectarea și cuantificarea proteinelor și acizilor nucleici.  Cu gama de reactivi PerkinElmer pentru detectarea proteinelor și acizilor nucleici în aplicațiile de blotting, puteți avea cel mai înalt nivel de sensibilitate și specificitate pentru a avea încredere în rezultatele dvs.


 Cercetătorii au depins de western blot timp de decenii pentru a efectua studii proteomice și pentru a valida multe rezultate experimentale, inclusiv studii posttranslaționale și CRISPR.  Cu metode de detectare chemiluminiscente, fluorescente și colorimetrice, substraturile de Western blotting îmbunătățite de la PerkinElmer, pe lângă reactivii noștri de detectare a acidului nucleic, vă pot menține studiile de cercetare pe drumul cel bun și pot merge mai departe.

Poza 1

Substraturi chemiluminiscente de blotting


 Un portofoliu de încredere de agenți de blotting cu peroxidază de hrean (HRP) sau fosfatază alcalină (AP) precisi și eficienți pentru aplicații de blotting Western sau Southern.


 Western Lightning™ ONE – Substrat HRP chemiluminiscent premixat dintr-o singură componentă, care oferă o gamă de sensibilitate la proteine ​​de la picogramă medie la femtogramă scăzută pentru rezultate mai consistente.


 Western Lightning™ – Substrat HRP chemiluminiscent cu două componente pentru detectarea fiabilă și sensibilă a proteinelor.

Poza 2

 Substraturi cromogene


 Pentru comoditatea vizualizării colorimetrice directe a rezultatelor fără a fi nevoie de un film sau un instrument de imagistică, contați pe substraturile noastre DAB și BCIP/NBT pentru utilizare în testele cromogene


 DAB pentru a detecta peroxidaza de hrean (HRP)


 BCIP/NBT pentru a detecta fosfataza alcalină (AP)


Anticorpi și proteine ​​secundare


 Oferim o varietate de anticorpi și proteine ​​secundari purificați cu afinitate marcați cu HRP, AP sau biotină care oferă o selectivitate excelentă pentru blotting, precum și pentru procedurile ELISA, histochimice și citochimice de colorare.